上一篇文章《細胞培養實驗室應該怎么樣做區域規劃》講到了細胞培養實驗室的區域規劃，有了區域規劃，在規劃設計的時候，我們還得考慮會用到哪些設備。下面小編就從常用設備和特殊設備兩方面來分析。

組織細胞培養室除一般實驗室的普通常規設備外，尚有一些特殊需要的設備?；究煞譃閮纱箢悾旱谝活悶槌Ｓ玫幕驹O備；第二類為較高級的特殊設備。

1、常用的基本設備

（1） 儀器：

a）顯微鏡：倒置顯微鏡——是組織細胞培養室所必需的日常工作常規使用設備之一，便于掌握細胞的生長情況并觀察有無污染等。

若有條件，尚可配置帶有照相系統的高質量相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統或縮時電影拍攝裝置等，以便隨時觀察、記錄、攝影細胞生長情況。

a） 培養箱：體外培養的細胞和體內細胞一樣，需要在恒定的溫度下生存，大多數情況下，最適溫度是37℃，溫差變化一般不應超過±0.5℃，細胞在溫度升高2℃時，持續數小時即不能耐受，40℃以上將很快死亡。因此需要有能控制溫度的培養箱，如具有較高靈敏度的恒溫培養箱及CO2培養箱。

恒溫培養箱——應選隔水式或晶體管自控溫培養箱，此類培養箱靈敏度高，溫度控制較穩定。一般的恒溫培養箱價格較便宜，其缺點是只宜于作密閉式培養。

CO2培養箱——目前多數的細胞培養室已廣泛使用。CO2培養箱的優點是能夠提供進行細胞培養時所需要的一定量的CO2（常用濃度為5％），易于使培養液的pH保持穩定，適用于開放或半開放培養。培養細胞的器皿可用培養皿、培養板或培養瓶；當使用培養瓶時，可將瓶蓋略微旋松，使培養瓶內與外界保持通氣狀態。由于這種培養方法培養器皿內部與外界相通，培養箱內空氣必須保持清潔，應定期以紫外線照射或酒精消毒。同時培養箱應放置盛有無菌蒸餾水的水槽，防止培養液蒸發，使箱內相對濕度始終保持為100％。

c）干燥箱：用于細胞培養箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用，玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時，電熱干燥箱升溫較高，一般需達到160℃以上。通常使用鼓風式電熱干燥箱。其優點是溫度均勻、效果較好，缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫后鼓風而應鼓風與升溫同時開始，至100℃時，停止鼓風，應避免包裹器皿的紙或棉花燒焦，燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后，不能立即打開箱門以免驟冷而導致玻璃器皿損壞，應等候溫度自然下降至100℃以下方可開門。

d）水純化裝置：細胞培養對水的質量要求較高，細胞培養以及與細胞培養工作相關的液體的配制用水必須事先嚴格純化處理。水純化時可采用離子交換裝置或蒸餾器。離子交換純水尚不能有效去除有機物，因此用水時尚需再次蒸餾。進行細胞培養時配制各種培養液及試劑等均需使用三次蒸餾水：即使是用于玻璃器皿的沖洗，也應使用二次以上蒸餾水。

目前國內使用較多的是自動雙重純水蒸餾器（石英管加熱），使用方便，安全、蒸餾速度快（1600ml/h）。

使用注意：

(a)不可采用普通自來水蒸餾，以免蒸餾器內很快結成水垢影響蒸餾效果；同時，還需視蒸餾器內存水垢程度定期徹底清洗蒸餾器。

(b)正確的使用方法是將經金屬蒸餾器蒸餾的蒸餾水加入玻璃蒸餾器內進行再次蒸餾。

一般配制培養液的用水應在配液前蒸餾，不宜使用存放數日的三蒸水，以免影響培養用水的質量。

目前市場上供應的是含有各種級別和類型的采用一種或多種純化方法相結合的使普通水純化為純水和超純水的純水系統可供選擇。例如：設計靈活的可以掛壁、也可為臺式，也可以有儲水箱、也可直接用分液槍的純水裝置；還可根據各類實驗用水需求選擇配備有效殺菌或去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等，甚至可有效去除掉熱源、內毒素的超濾型純水器。

e）冰箱：細胞培養室必須配備

(a)普通冰箱或冷藏柜

——儲存培養液、生理鹽水、Hank’s液試劑等培養用的物品及短期保存組織標本。

(b)低溫冰箱（-20℃）、超低溫冰箱

——用于儲存需要冷凍保存生物活性及較長時期存放的制劑，如酶、血清等。

——細胞培養室的冰箱應屬專用，不得存放易揮發、易燃燒等對細胞有害的物質，且應保持清潔。

f）細胞冷凍儲存器：儲存器常用的是液氮容器。根據使用需要分為不同的類型及多種規格。選擇購置液氮容器時要綜合考慮容積大小，取放使用方便及液氮揮發量（經濟）三種因素。液氮容器的大小可自25L～500L，可以儲存1ml的安瓿250～15000個左右。液氮溫度可低達-196℃，使用時應防止凍傷。由于液氮不斷揮發，應注意觀察存留液氮情況，及時定期補充液氮，避免揮發過多而致細胞受損。

目前，國內各類實驗室已廣泛使用新型的細胞冷凍儲存器。市場所提供的各種新型的細胞冷凍儲存器具有性能優異，使用方便等特點。例如：

——可通過先進的電子控制器實現凍存自動化并監測液氮水平和樣品溫度，確保樣品溫度始終處于設定溫度點；

——可配備先進的報警系統，分別警報液氮液面、溫度、電池、電壓、電源等失常情況：

——同時具備熱氣體旁路系統，防止高于-130℃的暖空氣進入液氮罐，從而更有效地保護樣品，防止升溫。

另外，多種規格的先進液氮運輸，供應罐系列不僅移動方便，還可通過連接管給儲存罐補充液氮，提高工作效率，保證樣品安全。

g）離心機：進行細胞培養時，常規需要進行制備細胞懸液、調整細胞密度、洗滌、收集細胞等工作，通常需要使用離心機。

(a)一般可常規配置4000rpm的國產臺式離心機，例如細胞沉降，使用80～100g的離心機即可，離心力過大有時可能引起細胞的損傷。

(b)另外，可根據需要添置其他類型如大容量或可調節溫度的離心機等

(c)若需特殊用途，例如某些細胞的分離制備需梯度離心，則需另行配置實驗所需的具備其他特殊功能的離心機。

h）天平：常用的有扭力天平、精密天平及各種電子天平。

分析天平的感量為0.1mg、0.01mg和0.001mg。根據稱取物質的量和稱量精度的要求，選擇適宜級別的天平。要求精密稱定時，當取樣量大于100 mg 選用感量為0.1mg天平，在100－10 mg 選用感量為0.01mg 天平，小于10mg選用感量為0.001 mg天平 。

i）消毒器：直接或間接與細胞接觸的物品均需消毒滅菌處理。常用如下：

(a)手提式高壓蒸汽消毒器;

(b)目前市場上，具有高效、安全、方便等性能，適用于各種器皿、液體、培養基的高壓滅菌裝置已在流通（如脈動真空滅菌器）?？晒┦褂谜咴跍缇耐瑫r監測滅菌容器內的壓力和溫度，確保滅菌質量和安全，并可通過記憶（儲存）支持系統改變各種參數（例如滅菌、排氣、加熱等參數），即使在進行滅菌時發生停電故障，仍可保留所設定的參數

j）濾器：目前細胞培養工作中采用的培養用液，包括人工合成培養液、血清、消化用胰酶等常含有維生素、蛋白、多肽、生長因子等物質，這些物質在高溫或射線照射下易發生變性或失去功能，因而上述液體多采用濾過消毒以除去細菌。

目前常使用的濾器有Zeiss濾器、玻璃濾器和微孔濾器，各種濾器有其使用原理和特點（后詳述）。

（2）培養用器皿：

a）培養器皿：供細胞接種、生長等用的器皿，可由透明度好、無毒的中性硬質玻璃或無毒而透明光滑的特制塑料制成。

（a）玻璃培養器皿的優點是多數細胞均可生長，易于清洗、消毒，可反復使用，并且透明而便于觀察；缺點是易碎，清洗時費人力。

（b）塑料制培養器皿的優點是一次性使用，廠家已消毒滅菌密封包裝，打開即可用于細胞培養操作。

常用的培養器皿：

培養瓶：由玻璃或塑料制成。主要用于培養、繁殖細胞。進行培養時培養瓶瓶口加蓋螺旋瓶蓋或膠塞，膠塞多用于密封培養。國產培養瓶的規格以容量（ml）表示，如250ml、100ml、25ml等；進口培養瓶則多以底面積（cm2）表示。

培養皿：由玻璃或塑料制成，供盛取、分離、處理組織或做細胞毒性、集落形成、單細胞分離、同位素摻入、細胞繁殖等實驗使用。常用的培養皿規格有10cm、9cm、6cm、3.5cm等。

多孔培養板：為塑料制品。可供細胞克隆及細胞毒性等各種檢測實驗使用。其優點是節約樣本及試劑，可同時測試大量樣本，易于進行無菌操作。培養板分為各種規格，常用的規格有：96孔、24孔、12孔、6孔、4孔等。

各種單層生長的細胞在培養器皿中長滿時可獲得的細胞數，主要是取決于器皿的底表面積和細胞體積的大小。常用培養器皿及可獲得的細胞數（以Hela細胞為例）見表2。

b）培養操作有關的器皿：

(a)貯液瓶：主要用于存放或配制各種培養用液體如培養液、血清及試劑等。貯液瓶分為各種不同規格，如1000ml、500ml、250ml、100ml、50ml、5ml等。

(b)吸管：主要分為刻度吸管、無刻度吸管?？潭任苤饕糜谖?、轉移液體，常用的有1ml、2ml、5ml、10ml等規格。無刻度吸管分為直頭吸管及彎頭吸管，除可以作吸取、轉移液體外，彎頭尖吸管還常用于吹打、混勻及傳代細胞。

(c)加樣器（移液器）：用于吸取、移動液體或滴加樣本?？筛鶕枰{節量的大小，吸量準確、方便。尤以微量加樣器，可保證實驗樣品（或試劑）含量精確，重復性良好。目前，可高溫消毒的，多通道的各類移液器可供使用者選擇，能確保加樣準確、快速、方便并且達到無菌要求。

c）其他用品：尚有收集細胞用的離心管，放置試劑或臨時插置吸管用的試管，裝放吸管以便消毒的玻璃或不銹鋼容器，用于存放小件培養物品便于高壓消毒的鋁制飯盒或貯槽，套于吸管頂部的橡膠吸頭，封閉各種瓶、管的膠塞、蓋子、凍存細胞用的安瓿或凍存管、不同規格的注射器、燒杯和量筒以及漏斗，超凈工作臺使用的酒精燈，供實驗人員操作前清潔消毒手使用的盛有酒精或其他消毒液的微型噴壺等。

（3）器械：主要用于解剖、取材、剪切組織及操作時持取物件。常用的有：手術刀或解剖刀、手術剪或解剖剪（彎剪及直剪），用于解剖動物、分離及切剪組織，制備原代培養的材料；眼科虹膜小剪（彎剪或直剪），用于將組織材料剪成小塊；血管鉗及組織鑷、眼科鑷（彎、直），用于持取無菌物品（如小蓋玻片）夾持組織等；口腔科探針或代用品，用以放置原代培養之組織小塊。

2、特殊設備

細胞培養實驗室除了應配備上述的常用基本設備以外，如有條件，可添置一些特殊或先進的設備儀器，以便更有效、更精確、更深入地進行實驗室工作。例如：

（1）酶聯免疫檢測儀——可用于進行免疫學測定及細胞毒性、藥物敏感性檢測等。

（2） 超低溫冰箱（-85℃）——便于儲存某些試劑及標本。

（3）旋轉培養器——用于某些特殊細胞或需要收獲大量細胞的培養。

（4）熒光顯微鏡——進行熒光染色樣本的觀察。

（5）流式細胞儀——可更精確及快速檢測細胞。

（6）用于檢測細胞培養條件的各種儀器，例如專門為快速分析細胞培養基中主要或關鍵營養成分、代謝產物及氣體含量設計的多功能細胞培養分析儀、手提式CO2濃度測定儀等。