獸醫(yī)檢測診斷實驗室的診斷檢測技術(shù)以及硬件建設(shè)
獸醫(yī)實驗室建設(shè)注意事項,主要是從獸醫(yī)檢測診斷實驗室做為動物疫病預(yù)防控制過程中的重要一環(huán),不僅擔負著動物疫病病原監(jiān)測和流行病學調(diào)查、免疫抗體效果監(jiān)測、動物疫病診斷等重要職責,還能夠為動物疫病的預(yù)防控制提供重要的理論依據(jù)和參考憑證,在動物疫病防控體系中占有重要的地位。
當前,規(guī)模養(yǎng)殖企業(yè)、養(yǎng)殖場、養(yǎng)殖戶對動物疫病控制的要求越來越高,迫切需要全方位的疫病診斷檢測服務(wù)。而當前動物疫病十分復(fù)雜,畜禽傳染病已成為畜牧養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要障礙,傳統(tǒng)的靠臨床癥狀和剖檢診斷已很難確診。此外,畜牧業(yè)的生產(chǎn)經(jīng)營觀念發(fā)生了根本轉(zhuǎn)變,“防重于治”的疫病防控觀念已為廣大養(yǎng)殖工作者所接受。因此,加強獸醫(yī)檢測診斷實驗室建設(shè)十分必要。
一、獸醫(yī)檢測診斷實驗室常用的診斷檢測技術(shù)
動物疫病診斷常用的實驗室檢測診斷技術(shù)包括:獸醫(yī)病理學診斷與檢測技術(shù)、血清學檢測技術(shù)、分子生物學檢測技術(shù)和病原學檢測技術(shù)等。
1.1 病理學診斷檢測技術(shù)
獸醫(yī)病理學診斷技術(shù)是獸醫(yī)病理學的一個組成部分,它運用病理學和其它學科的知識,通過檢查畜禽的病理變化(肉眼檢查及病理組織學檢查)來診斷疾病的一種方法,為研究病理變化的發(fā)生、發(fā)展和結(jié)局的規(guī)律性、探索未知疾病和進一步認識已知疾病提供重要的科學資料。此外,病理學診斷與免疫學技術(shù)相結(jié)合增加了病理學診斷技術(shù)的可靠性,如免疫組織化學技術(shù),是根據(jù)標記的抗體(或抗原)對細胞、組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)進行定性、定位或定量檢測,通過組織化學顯色后,用肉眼或在顯微鏡或熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。
1.2 血清學檢測技術(shù)
血清學檢測技術(shù)是建立在抗原抗體特異性反應(yīng)基礎(chǔ)上的檢測技術(shù),按照反應(yīng)性質(zhì)不同可分為凝集性反應(yīng)(如凝集試驗和沉淀試驗)、標記抗體技術(shù)(包括熒光抗體、酶標抗體、放射性標記抗體等)、補體參與的反應(yīng)、中和試驗(病毒中和試驗和毒素中和試驗)以及免疫轉(zhuǎn)印技術(shù)等。其中酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)是當前應(yīng)用最廣的一項技術(shù)。
1.3 分子生物學檢測技術(shù)
利用分子生物學技術(shù),建立對動物疫病病原基因的檢測方法,用于動物疫病特異性快速診斷和病原基因變異快速分析,及時掌握動物疫病分子流行病學動態(tài),為疫病防治提供基因理論分析依據(jù)。在獸醫(yī)臨床診斷中,聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)是發(fā)展最快和最實用的分子生物學診斷技術(shù),它是一種體外快速擴增DNA的技術(shù),同時,結(jié)合RNA反轉(zhuǎn)錄技術(shù)對各種病原的DNA和RNA進行快速擴增,擴增產(chǎn)物通過瓊脂糖凝膠電泳進行分析,達到快速診斷的目的。
1.4 病原學檢測技術(shù)
運用現(xiàn)代微生物學和細胞培養(yǎng)技術(shù),開展對動物病毒、細菌和寄生蟲等致病性微生物的分離、培養(yǎng)和鑒定工作對于獸醫(yī)臨床疫病診斷具有重要意義。細菌病原的檢測包括細菌的分離與接種、細菌的培養(yǎng)、細菌的鑒定及耐藥性檢測等內(nèi)容。病毒分離與鑒定是病毒性疫病檢測、診斷和流行病學調(diào)查的重要方法之一。由于寄生蟲有其獨特的發(fā)育史,其檢測方法除了一般的流行病學調(diào)查和臨床診斷檢測外,還包括蟲卵檢查法、蟲體檢查法、免疫學檢測方法和分子生物學檢測方法。
病原學檢測主要目的是對患病的個體或群體進行更準確的診斷,以便及時采取正確的處理措施;對動物進行檢疫,確定是否帶有某種病原;對疫病進行流行病學調(diào)查、追蹤調(diào)查或回顧性調(diào)查;以及對未知的新發(fā)疫病病原進行鑒定等。
二、獸醫(yī)檢測診斷實驗室的硬件建設(shè)
2.1 實驗室布局
根據(jù)功能要求,獸醫(yī)檢測診斷實驗室應(yīng)至少設(shè)置病理學診斷檢測室、血清學檢測室、病原學檢測室和分子生物學檢測室,此外還應(yīng)設(shè)置相對獨立的接待區(qū)和樣品采集區(qū),專門負責外來病例、樣品的登記、處理、保存、管理以及檢測報告的出具與保存等。同時,實驗室的建筑質(zhì)量要可靠,布局要合理,面積要合適,同時對溫度、濕度、除塵、通風和污水處理等問題均要在基礎(chǔ)建設(shè)時考慮在內(nèi)。各實驗區(qū)應(yīng)盡量獨立分區(qū),避免交叉污染,特別是分子生物學檢測實驗室,要嚴格進行分區(qū),避免污染,保證實驗結(jié)果的可靠性。必要時,也要設(shè)施一些公共實驗室,如物品準備室(放置制水機、高壓滅菌器、干烤箱等公用儀器設(shè)備)、藥品試劑室等。
2.2 實驗室常用儀器設(shè)備
在配置儀器設(shè)備時,應(yīng)根據(jù)實際工作需要,充分了解同類產(chǎn)品的性能和特點后選定。一方面要考慮其功能、配件等因素,充分發(fā)揮其功能和擴展功能,另一方面,要考慮其使用價值及使用頻率,有目的的選擇,而不應(yīng)盲目求全。有些儀器自動化程度高,操作方便,但價格昂貴,可根據(jù)實驗室工作量來確定。如果工作量不大,可適當選擇自動化程度稍低,但通過其他成本較低的方法來達到檢測目的的產(chǎn)品。有些大型儀器利用率很低,而在社會上可以有償使用的,則不提倡購置,以免投入不必要的維護管理成本。
三、獸醫(yī)檢測診斷實驗室工作人員的配置
根據(jù)獸醫(yī)臨床診斷的特點和需求,疫病診斷實驗室的工作人員應(yīng)具有如下基本要求:具有扎實的專業(yè)知識;具有良好的道德規(guī)范,能獨立完成診斷檢驗的工作,對結(jié)果的判定不受外界因素的干擾影響;必須保持相對穩(wěn)定;具有高度的安全意識;具有預(yù)防和處理感染事故的能力。
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